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正置熒光顯微鏡的濾色系統(tǒng)是如何工作的?
點(diǎn)擊次數(shù):999 更新時(shí)間:2021-04-12
  正置熒光顯微鏡的濾色系統(tǒng)是如何工作的?
  正置熒光顯微鏡是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,正置熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。
  濾色系統(tǒng)是熒光顯微鏡的重要部位,由激發(fā)濾板和壓制濾板組成。濾板型號(hào),各顯微鏡廠家名稱常不統(tǒng)一。濾板一般都以基本色調(diào)命名,前面字母代表色調(diào),后面字母代表玻璃,數(shù)字代表型號(hào)特點(diǎn)。
  1.激發(fā)濾板根據(jù)光源和熒光色素的特點(diǎn),可選用以下三類激發(fā)濾板,提供一定波長(zhǎng)范圍的激發(fā)光。
  紫外光激發(fā)濾板:此濾板可使400nm以下的紫外光透過(guò),阻擋400nm以上的可見光通過(guò)。常用型號(hào)為UG-1或UG-5,外加一塊BG-38,以除去紅色尾波。
  紫外藍(lán)光激發(fā)濾板:此濾板可使300~450nm范圍內(nèi)的光通過(guò)。常用型號(hào)為ZB-2或ZB-3,外加BG-38。
  紫藍(lán)光激發(fā)濾板:它可使350~490nm的光通過(guò)。
  最大吸收峰在500nm以上者的熒光素(如羅達(dá)明色素)可用藍(lán)綠濾板(如B-7)激發(fā)。開始采用金屬膜干涉濾板,由于針對(duì)性強(qiáng),波長(zhǎng)適當(dāng),因而激發(fā)效果比較玻璃濾更好。激發(fā)濾板分薄厚兩種,一般暗視野選用薄濾板,亮視野熒光顯微鏡可選用厚一些?;疽笫且垣@得最明亮的熒光和*背景為準(zhǔn)。
  2.壓制濾板壓制濾板的作用是*阻擋激發(fā)光通過(guò),提供相應(yīng)波長(zhǎng)范圍的熒光。與激發(fā)濾板相對(duì)應(yīng),常用以下3種壓制濾板:
  紫外光壓制濾板:可通過(guò)可見光、阻擋紫外光通過(guò)。能與UG-1或UG-5組合。
  紫藍(lán)光壓制濾板:能通過(guò)510nm以上波長(zhǎng)的光(綠到紅),能與BG-12組合。
  紫外紫光壓制濾板:能通過(guò)460nm以上波長(zhǎng)的光(藍(lán)到紅),可與BG-3組合。
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